為了得到一個(gè)PAGE所需的聚合完全的凝膠，聚丙烯酰胺凝膠需要在室溫下凝聚69hr。最后，得到均質(zhì)的含機(jī)械穩(wěn)定和自由的單體或原子。凝膠的孔徑很大，因此分子篩作用在電泳分離中最小化。基于上述原因，凝膠和活性分子之間的相互作用可以忽略。待分離的金屬蛋白（如金屬分子伴侶，蛋白酶感染性初級(jí)因子，金屬運(yùn)輸?shù)鞍�，淀粉狀蛋白，金屬酶，金屬肽等）不�?huì)分解成脫輔蛋白和金屬輔助因子。孤立蛋白的生物活性結(jié)構(gòu)（天然或3D構(gòu)象）在QPNC-PAGE后不會(huì)發(fā)生構(gòu)象變化。所以，金屬蛋白和蛋白異構(gòu)體在PAGE中被定量的分成高純度的部分。QPNC與其它電泳技術(shù)如SDS-PAGE，2-DE，等速電泳和CN- PAGE等相比被稱為“突破性的方法”。
1.3.3 實(shí)驗(yàn)方法
（1）儲(chǔ)備液
1）200mM Tris-HCl 10mM NaN3 PH10.00，室溫
2）200mM Tris-HCl 10mM NaN3 PH8.00，室溫
3）40%丙烯酰胺/雙丙烯酰胺2.67C，4℃（新鮮）
（2）電泳緩沖液
20mM Tris-HCl 1mMNaN3 PH10.00（除氣），4℃
電泳槽上部：500ml電泳緩沖液
電泳槽下部：2000ml電泳緩沖液
（3）洗脫液
20mM Tris-HCl 1mMNaN3 PH8.00（除氣），4℃
洗脫室：700ml洗脫緩沖液
（4）分離膠
丙烯酰胺4%T 體積40ml
成分：
4ml40%丙烯酰胺/雙丙烯酰胺2.67C
4ml 200mM Tris-HCl 10mM NaN3 PH10.00
32 mL H2O
200 μL 10% APS
20 μL TEMED
APS和TEMED最后加入。輕輕攪拌燒瓶中的混合物，注意不能產(chǎn)生氣泡。然后把溶液移入內(nèi)徑為28mm，長(zhǎng)為40mm有刻度的玻璃柱中。加入3ml正丙醇。60分鐘聚合后用電泳緩沖液沖洗凝膠，然后用4ml電泳緩沖液覆蓋凝膠表面。在室溫下凝集69小時(shí)。news.yudamai.cn
本文標(biāo)題:聚丙烯酰胺的凝膠特征 本文來(lái)自河南晶科水處理材料有限公司（news.yudamai.cn），轉(zhuǎn)摘聚合氯化鋁請(qǐng)注明出處。
上一篇：【配置陽(yáng)離子聚丙烯酰胺溶液時(shí)應(yīng)注意。】
下一篇：【聚丙烯酰胺樣品的采集】